| Личные данные | |
|---|---|
| Дата рождения: | 08.05.1988 |
| Пол: | Мужской |
| Профессия: | Стюардесса |
| Место жительства: | Россия, Малоярославец |
| Интересы: | А.В. Майоров, канд. Техн. Наук, доцент а.С. Кулалаева, студент а.Э. Леухин, студент Марийский государственный университет (россия, г. Йошкар-ола) Doi:10.24412/2500-1000-2021-10-1-114-116 Аннотация. Производство полуфабрикатов является одной из главных производственных циклов мясоперерабатывающего разработок и его действенность определяется степенью оснащенности технологическими машинами и средствами механизации вспомогательных процессов, их техническим уровнем, надежностью, удельными технико-экономическими показателями. В изготовлении замороженных полуфабрикатов высокой готовности немаловажной операцией является тепловая обработка. Выше рассматривается термокамера для термообработки полуфабрикатов. Недостатком рассматриваемой коптильной камеры является невысокая эффективность термообработки котлет, несущая в себе неравномерностью обработки продукта во всем рабочем объеме камеры, поскольку рассматриваемая термокамера пошита специально для подготовки и тепловой обработки колбасных изделий. Поэтому предлагается модернизированная конструкция коптильной камеры, в которой продуктовая тележка с полуфабрикатами получает вращательное движение. Предлагаемая модернизация коптильной камеры предоставляет шанс обеспечить оптимальные условия обработки во всем рабочем объеме камеры, и расширить область ее применения, так и повысить производительность коптильной камеры. Ключевые слова: полуфабрикаты, термообработка, модернизация, эффективность, неравномерность. При изготовлении мясных изделий тепловая манипуляция являются заключительной, формирующая окончательно ор-ганолептические описания продукта: цвет, запах, консистенции и, безусловно, вкус. К таким операциям относятся: подсушка, обжарка, копчение, варка, запекание, сушка [1-2]. Для выполнения перечисленных технологических реакций применяют разнообразные аппараты периодического и непрерывного действия, однооперационные и комбинированные. Существенным шагом, определяющим их конструкцию, является способ подвода теплоты и тем более, вид обрабатывающей среды. В роли теплоносителей применяют жидкие, газообразные среды и пар [3-4]. На предприятиях, в производстве замороженных полуфабрикатов высокой готовности включена операция термообработки, которая изготавливается в термокаме- Ре, включающей камеру, дымогенератор, систему автоматического управления, воздуховод. В задней части камеры расположен тепловой блок, состоящий из электронагревателей, паровой вместимости, и циркуляционных вентиляторов. Недостатком рассматриваемой коптильной камеры является невысокая эффективность термообработки котлет (недоварка или переварка), несущая в себе неравномерностью обработки продукта во всем рабочем объеме камеры, т.К. Рассматриваемая термокамера предназначена для учебу и тепловой обработки колбасных изделий. Поэтому предлагается модернизированная конструкция коптильной камеры, схема которой представлена на картинке. Модернизированная коптильная камера включает корпус камеры 1, на подвале которой устанавливается поворотный механизм, состоящий из электродвигателя 2, Ременной третьи червячной 4 передач. Выходной вал 5 червячной передачи 4 соединяется через муфту 6 с приводным валом 7. К валу 7 прикрепляется платформа, состоящая из рамки-водила 8 и поворотного стола 9, базирующегося на ось 10, являющийся одновременно шариковым фиксатором. Модернизированная коптильная камера в режиме тепловой обработки полуфабрикатов работает пошагово. Для осуществления термообработки полуфабрикатов котлеты ставят на тележке, которую помещают в камеру. Продуктовая тележка на колесиках 11 загружается на поворотный стол 9 и фиксируется шариковым фиксатором 10. Стол приводится в силу от электродвигателя 1, ременную 2 передачу и червячную 4 передачу, червячное колесо которой соединено с приводным валом 7 через муфту. Ведущий диск муфты опробован на выходном валу 5, ведомый - на валу 7. N11 Рис. Схема модернизированной термокамеры 1 - корпус камеры; 2 - электродвигатель; 3 - ременная передача; 4 - червячная передача; 5 - выходной вал; 6 - муфта; 7 - приводной вал; 8 - рамка-водило; 9 - поворотный стол; 10 - ось (шариковый фиксатор); 11 - продуктовая тележка На приводном валу закреплена рамка-водило 8, соединенная снизу со столом 9 регулируемыми опорами. Поворотный стол вращается с частотой 30 оборотов в минуту. С пульта управления устанавливают заданный режим термообработки. Рабочая температура в камере 195°с, кратковременная - 200°с.Рабочей средой служат сухой окружающий воздух точно так же как воздушно-паровая смесь. Включают электронагреватель или паровую емкость. Нагретая паровоздушная смесь от паровой емкости поступает в нижнюю часть камеры, и за счет градиента температур поступает в камеру для термообработки помещенных в игру продуктов. Отработанная паровоздушная смесь поступают по трубопроводам в гидравлический затвор. За счет того, какие в камере тележка с полуфабрикатами получает вращательное движение, она дополнительно приводит в силу тепловой поток, способствующий более равномерному распределению температур и в результате равномерной термообработке котлет. Таким образом, предлагаемая модернизация коптильной камеры позволяет предоставить близкие к идеальным условия обработки во всем рабочем объеме видеокамеры, и расширить область ее использования. Библиографический список 1. Ивашов, в.И.Технологическое оборудование предприятий мясной промышленности: учеб. - Спб.: Гиорд, 2010. - 736 с. 2. Автомобили и аппараты пищевых производств: учебник для вузов. В 3-х книгах. Кн. 1 / с.Т. Антипов [и др..]; Под ред. В.А. Панфилова. - Второе изд. Перераб. И доп. - М.: "Колосс", 2009. - 610 с.; 3. Трактора, и агрегаты пищевых производств: учебник для вузов. В 3-х книгах. Кн. 2 / с.Т. Антипов [и т.Д..]; Под ред. В.А. Панфилова. - Второе изд. Перераб. И доп. - М.: "Колосс", 2009. - 847 с. 4. Особого устройства и агрегаты пищевых производств: учебник для вузов. В трех книгах. Кн. 3 / с.Т. Антипов [и др..]; Под ред. В.А. Панфилова. - Две изд. Перераб. И доп. - М.: "Колосс", 2009. - 551 с. Modernization of the thermal chamber for heat treatment of Semi-finished products A.V. Mayorov, candidate of engineering sciences, associate professor A.S. Kulalaeva, student A.E. Leukhin, student Mari state university (Russia, yoshkar-ola) Abstract. The creation of semi-finished products is one of the general production cycles of a meat-processing enterprise, and its efficiency is determined by the degree of equipment with technological machines and help of mechanization of auxiliary processes, their technical level, reliability, and specific technical and economic indicators. Inside the production of frozen semi-finished goods of high readiness, heat treatment is an important operation. The article discusses a heat chamber for heat treatment of semi-finished products. The disadvantage of the considered smoking chamber is the low efficiency of heat treatment of cutlets, associated with the uneven processing of the product inside the entire working volume of the chamber, since the considered heat chamber is intended for the preparation and heat treatment of sausages. Therefore, a modernized styling of the smoking chamber is proposed, in which the grocery cart with semi-finished products receives a rotational movement. The proposed modernization of the smoking chamber allows to ensure optimal processing conditions inside the entire working volume of the chamber and to increase the spectrum of its application, as well as to increase the productivity of the smoking chamber. Для обладательниц в наличии какие-нибудь вопросы касательно того, в каком месте и каким обракзом вы получите возможность применять , вы, возможно, можете обратиться нам на нашем веб-сайте. |
| Информация о работе | |
|---|---|
| Компания: | |
| Должность: | Стюардесса |
| Место расположения: | Улица Титова |
| Направление деятельности: | Сельскохозяйственная биология, 2019, том 54, № 3, с. 557-565 Культуры in vitro Удк 633.18:581.143.6 doi: 10.15389/agrobiology.2019.3.557rus Сезонность андрогенетических ответов в менталитете пыльников риса (oryza sativa l.) In vitro М.В. Илюшко, м.В. Ромашова Условия выращивания растений-доноров в андрогенезе in vitro рассматриваются с точки зрения воздействия на растения физических факторов (освещенность, длина осветительного дня, температура, doleschal питание растений). Многие полагают, что для культуры клеток и тканей in vitro подходит любой сезон, но в определённые периоды года культуры in vitro вырастают, и раскручиваются лучше, нежели в другие. Исследований, связанных с одобрением в культуру пыльников in vitro во любые периоды года мы не придумали. В настоящей работе впервые показано, что интенсивность каллусообразова-ния и регенерации растений риса посевного (oryza sativa l.) Различается исходя из месяца введения пыльников в культуру in vitro при единообразных условиях выращивания растений-доноров всего за года. Пониженная температура 21 °с позволяла получать каллус с любой интенсивностью в течение всего года, при соответствующей риса температуре 24 °с наблюдалась большая сезонная зависимость. Нашей целью было изучение сезонной зависимости андрогенети-ческих ответов in vitro риса при выращивании растений-доноров в контролируемых условиях климатической камеры при двух температурных режимах. В отделке использовали пыльники риса подвида japónica kato сорта каскад. Растения-доноры высаживали в почва ежемесячно 15 числа по 5-9 растений в течение г. И помещали в климатическую камеру при температурах 24 и 21 °с, освещенности 15 тыс. Лк, влажности 60 %, фотопериоде 14/10 ч (свет/темнота). Контролем служили пыльники с растений, выращенных на вегетационной сайте в естественных условиях. В контроле пыльники вводили в культуру in vitro через несколько недель 2015 и 2016 г. В количестве 400 шт. Перед введением в культуру пыльники риса подвергали воздействию низких положительных температур (5% с) на протяжение семь сут, помещая метелки в цилиндры с водичкой. Культивирование проводили на индукционной питательной среде n6. Число высаженных пыльников ежемесячно составляло от 400 до 702 шт. Максимальная частота каллусообразования приходилась на май-июнь (15,5-28,3 %). При выращивании растений-доноров в искусственных условиях при обеих температурах в этот период каллусообразование было выше, чем в контроле. Использование климакамеры позволяло изучить в специальные месяцы стабильно высокие значения интенсивности каллусообразвания, но это не всегда удобно в естественных условиях выращивания исходных растений. Температура выращивания растений-доноров влияла на каллусообразование и регенерационную способность побегов из пыльников риса. Низкая для риса температура (21 °с) позволяла получать каллус ежемесячно с той или иной интенсивностью (1,0-15,5 %). При оптимальной температуре 24 °с в вешний и позднеосенний периоды образования каллуса из пыльников не наблюдалось. При температуре выращивания растений-доноров 21 °с формировалось в 4 раза больше каллусов с зелеными регенерантами (31,6 %) в сравнении с температурой 24 °с (8,8 %), увеличивалась доля удвоенных гаплоидов до 28,1 % какие среднее число на каллус до 16,6 шт. Выявлена средняя корреляционная зависимость между долей каллусов с зелеными регенерантами и средним числом удвоенных гаплоидов на каллус (r = 0,59 при р = 0,05). Это значит с усилением числа каллусов с зелеными регенерантами, которое наблюдалось при 21 °с, возрастал общий выход удвоенных гаплоидов. По числу гаплоидов такой зависимости не отмечали. Так, вполне оправдано применение закрытых помещений, теплиц, климакамер) не только в целях создания регулируемых условий для взращивания растений-доноров, что зачастую практикуется исследователями, но и при использования наиболее благоприятного периода введения пыльников в культуру in vitro. Ключевые слова: oryza sativa l. Андрогенез in vitro, каллусообразование, регенерация, удвоенные гаплоиды, сезонность. Культура пыльников риса in vitro необходим для генетических исследований и селекционных целей, с 1968 года (1). Работы по выдаче удвоенных гаплоидов риса успешно проводятся на протяжении пяти десятилетий, однако выведение новых сортов, гибридов и брендов требует оптимизации условий культивирования пыльников, поскольку известна значительная зависимость каллусообразования и регенерации от генотипа исходного растения. Она считается центральной проблемой в андрогенезе растений in vitro, даже у риса (2-4). Все-таки существует и ряд Других факторов, влияющих на это андрогенеза: условия выращивания растений-доноров, шоковая обработка пыльников перед введением в культуру in vitro, составы питательных сред, условия культивирования пыльников и каллусов (5-7). Условия выращивания растений-доноров рассматриваются с позиции воздействия на них физических факторов (освещенность, длина светового дня, температура, питание растений) (5-8). Говорят, что для культуры клеток и тканей растений in vitro подойдет любой период (сезон), в каких обстоятельствах и заключается ведущее преимущество данной технологии по сравнению с традиционным сельскохозяйственным производством (9). Однако опытные исследователи знают, что культуры in vitro в отдельные периоды года растут, и развиваются привлекательнее, чем в другие. Начали разрабатываться немногочисленные экспериментальные информация о сезонности развития растений в обстоятельствах in vitro. Так, черенкование sequoiadendron giganteum (lindl.) J. Buchholz весной (март-май) способствует более длительному сохранению большего числа живых черенков (10). У розы эфиромасличной, выращенной в предгорной зоне крыма, летний период был наиболее благоприятным. Число развивающихся эксплантов у пяти сортов в этот период достигло 92-97 %, осенью показатель был минимальным - 40-72 % (11). У розы на южном берегу крыма лучшими сроками отбора и введения экс-планта в культуру были февраль-март, когда частота развития меристем достигала 92-100%, в осенне-летний период этот параметр не превышал 10-15 % (12). Авторы заключают, что такая морфогенетическая реакция обусловлена физиологическим состоянием органа растения, и выделяемого из него экспланта (12). Исследований, вызванных введением пыльников в культуру in vitro на все периоды годы мы не нашли. Сезонность рассматривается исключительно после сравнении растений-доноров, выращенных в полевых основе, и на протяжении закрытых залах. Некоторые исследователи круглогодично вводят пыльники in vitro без стабильного результата, однако как правило культивирование стараются применить в завершение весны. Есть много сообщений об применении теплиц и климакамер, где сажают растения-доноры для культуры пыльников риса (13, 14). Ключевое плюс использования закрытых помещений - возможность регулировки условий выращивания (5-6) и асептическая чистота вводимых в культуру пыльников (10-15). Абсолютно во всех этих работах упор делается на условия взращивания исходных растений, но не на сезонность. В проблематике условий выращивания растений-доноров также нет однозначного ответа, равно как начать максимальный выход удвоенных гаплоидов. Исследователи едины в глазах, что для различных видов, родов и семейств условия положено неодинаковыми (4, 16). Для риса в большинстве случаев стараются составить максимально приемлемые условия для роста и становления исходных растений (2, 6) как в поле (17-19), так и в запечатанных помещениях (13, 14). Есть отдельные свидетельства, что стрессовые условия выращивания исходных растений благоприятно задействуют процессы каллусообразо-вания или регенерации побегов. У риса, растущего в сухой сезон, больше микроспор в пыльниках, способных к андрогенетическим ответам (6). У растений, выращенных при 18-20 °с, в сопоставлении с выращиванием при 26-28 °с частота получения каллусов и регенерация зеленых побегов были свыше, нежели в дважды выше, а образование альбиносов - ниже (цит. По 20). Частота формирования зеленых регенерантов оказалась выше при выращивании растений-доноров в культуральной комнате при 20 °с чем на Вегетационной площадке (21). Такие экспериментальные данные также получены в отрыве от сезонной зависимости. В настоящем исследовании впервые показано, что интенсивность каллусообразования и регенерации растений риса посевного различается зависимо от месяца введения пыльников в культуру in vitro при единообразных условиях выращивания растений-доноров до 12 месяцев. Наиболее благоприятным периодом для входа пыльников в условия in vitro были май-июнь. Пониженная температура 21 °с позволяла получать каллус с различной интенсивностью в течение всего года, при приятной для риса температуре 24 °с наблюдалась большая сезонная зависимость. Целью работы было изучение сезонной зависимости андрогенети-ческих ответов риса oryza sativa l. При разведении растений-доноров в контролируемых условиях климатической камеры in vitro при двух температурных режимах. Методика. Опыты проводили в фнц агробиотехнологий дальнего востока им. А.К. Чайки. В работе использовали пыльники риса o. Sativa подвида japonica kato сорта каскад. Растения-доноры высаживали в почва по 5-9 шт. Ежемесячно 15 числа до 12 месяцев и помещали в климатическую камеру mlr-352h («sanyo», япония) при следующих условиях: температура 24 и 21 °с, освещенность 15 тыс. Лк, влажность 60 %, фотопериод (свет/темнота) 14/10 ч. Эксперимент с температурой 24 °с закладывали три года назад, с температурой 21 °с - в этом году. Контролем служил вариант выращивания растений-доноров на вегетационной веб-ресурсе, в сосудах. В контроле пыльники (400 шт.) Вводили в культуру in vitro к осени 2015 и 2016 годов. Перед введением в культуру пыльники риса подвергали воздействию низких положительных температур (пять процентов с) в течение 7 сут, помещая метелки в цилиндры с водичкой. Культивирование проводили на индукционной питательной среде n6 (22). Число высаженных пыльников ежемесячно составляло от 400 до 702 шт. Пыльники культивировали в темноте при темпрературе воздуха 25-27 °с до появления каллуса размером полтора мм. Затем его переносили на среду ng-рк (23) для регенерации побегов. Условия культивирования каллусов в культуральной комнате: освещенность 4 тыс. Лк, температура 22-25 °с, фотопериод 16/8 ч. Для укоренения регенерантов использовали среду ms (24) с половинным минеральным составом макросолей в вариации, приведенной ю.К. Гончаровой (20). Регенеранты с развитой системой корней высаживали в горшечную достопримечательности и продолжали взращивать в условиях культуральной комнаты до образования семян. По морфологическим признакам все саженцы-регенеранты разделили на категории: гаплоиды (без семян с очень мелкими цветками); удвоенные гаплоиды (с зёрнами); тетраплоиды (с наиболее крупными немногочисленными семенами, выраженным килем и ребристостью на цветочной чешуе); растения без семян (сформировали цветки нормального размера, однако не образовали семян на нескольких метелках); растения, погибшие на ранних этапах роста и образования. Статистическую обработку информации проводили в программе statistica 10 («stаtsoft inc.», Сша). Определяли среднее значение признака (м), стандартное отклонение (±sem), коэффициент корреляции (r). Разницу среди вариациями оценивали с помощью t-критерия стью-дента при уровне значимости самое меньшее пяти %. Результаты. При температуре выращивания растений-доноров 24 °с в культуру было введено 5172 пыльника, при 21 °с - 7278 пыльников (Всего 12450 шт.). Сезонная зависимость наблюдалась при обеих температурах выращивания исходных растений, максимум частоты каллусообразо-вания приходился на май при темпрературе воздуха 24 °с (рис. 1, а также на май-июнь при 21 °с (см. Рис. 1, б). Однако, низкая для риса температура позволяла получать каллус ежемесячно с той или иной интенсивностью (1,0-15,5 %). При оптимальной температуре 24 °с в весенний и позднеосенний периоды образования каллуса из пыльников не наблюдалось. Среднее значение каллусообразования по месяцам при температуре 24 °с составляло 4,5 %, при 21 °с - 3,9 % (различия статистически не достоверны). Рис. 1. Каллусообразование (%) у риса (oryza sativa spp. Japónica) сорта каскад исходя из месяца введения пыльников в культуру in vitro и температуры выращивания растений-доноров: а - 24 °с, б - 21 °с. 1. Доля каллусов риса (oryza sativa spp. Japónica) сорта каскад с зелеными ре-генерантами и альбиносами исходя из месяца введения пыльников в культуру in vitro и температуры выращивания растений-доноров Месяц Доля каллусов, % С зелеными регенерантами с альбиносами Соотношение зеленые регенеранты/альбиносы Май 13,7 37,1-3,5 Июнь 7,7 23,1 20,5 Июль 5,9 26,5 0,8 Август (контроль) 12,8 25,5 1,3 Август 5-6 16,7 0,9 Сентябрь 0 33,3 0 Декабрь 15,9 15,9 24,3 Среднее (m±sem) 8,8±2,1 25,4±3,0 7,3±3,9 Январь 33,3 16,7 20,0 Февраль 21,4 21,4 23,7 Март 50,0 16,7 18,3 Апрель 20,0 20,0 7,6 Май 33,3 22,2 18,4 Июнь 56,3 59,8 5,4 Июль 23,1 7,7 9,8 Август 33,3 52,4 2,3 Август (контроль) 0 40,0 0 Сентябрь 22,2 38,9 8,0 Октябрь 60,0 20,0 44,0 Ноябрь 50,0 16,7 21,1 Декабрь 20,0 26,7 50,0 Среднее (m±sem) 31,6±5,0 27,6,4,3 17,6,4,2 Примечание. Средние значения (м) доли каллусов с зелеными регенерантами при 24 и 21 °с статистически значимо различаются при р = 0,01. Значения частоты каллусообразования в контроле в 2015 и 2016 годах различествовали. Так, условия прошлого года были типичными для культивации и размножения исходных растений, что привело к высокой частоте каллусообразования (11,7 %) (см. Рис. 1, а). Сейчас сбор метелок пришелся на знойный период, что могло повлиять как негативный стрессор на интенсивность каллусообразования, которое составило 1,4 см. Рис. 1, б), и привело к окончательному отсутствию регенерации побегов. При разведении растений-доноров в искусственных условиях при обеих температурах в лучшее время введения пыльников в культуру in vitro (май-июнь) каллу- Сообразование было больше, нежели в контроле. Говоря другими словами использование клима-камеры позволило получить в особые месяцы невероятно высокое кал-лусообразвание, что не каждый день удобно в естественных обстоятельствах выращивания исходных растений. При температуре выращивания исходных растений 24 °с приблизительно было получено 8,8 % каллусов с зелеными регенерантами, и при температуре 21 °с показатель достоверно (t = 3,35 при p = 0,004) увеличился в 4 раза и составил 31,6 % (табл. 1). Следовательно, низкая для риса температура повлияла не только на расширение периода каллусообразо-вания в течение года, но также на частоту образования каллусов с морфоге-нетическими ответами. Наметилась склонность к уменьшению альбинизма в два раза. Интересно отметить, что при других способах увеличения ре-генерационной способности побегов из пыльников, например, при отборе среды для восстановления из каллуса, также: растет количество зеленых регенерантов за счет большего выхода каллусов, способных к морфогене-тическим ответам (23). Альбинизм воспринимается как проблема при выигрыше расте-ний-регенерантов у зерновых культур (4-6). В нашей работе доля альбиносов была намного меньше, нежели зеленых регенерантов (см. Табл. 1), формировались они только на этапе планирования морфогенеза и просто удалялись с каллуса. Последующий пассаж каллусных агрегатов с зелеными инициалями позволял нормально развиться десяткам и сотням зеленых регенерантов. 2. Среднее число зеленых регенерантов на каллус в зависимости от месяца введения пыльников риса (oryza sativa spp. Japónica) сорта каскад в культуру in vitro (m sem) Число, шт. Месяц каллусов гаплоидов удвоенных гаплоидов тетраплоидов погибших растений растений без семян Температура 24 с Май 17 54,1±13,3 14,8±3,9 0 11,2-3-5 0,3±0,2 Июнь 1 157 4 0 44 0 Июль 2 16,0±10,0 13,5±9,5 0 два с половиной±полтора 0 Август (контроль) 6 17,2±15,4 3,7±1,8 0 1,7±0,8 процентов % процентов процентов % 0 Август 1 14 0 0 1 0 Декабрь 7 54,9±24,4 28,0±11,3 1,6±1,6 11,1±8,9 1,4±0,8 Среднее 5-7±два с половиной 10,9±5-6 несколько±двух-четыре 0,3±0,3 11,9±6,7 0,3±0,2 Температура 21 °с Январь 2 90,5±0,5 1,0±0,0 0,8 % процентов процентов % процентов,5±0,5 0 Февраль 3 33,0±31,5 28,3±27,3 0,3±0,3 9,7±2,9 4,три-4,3 Март 6 17,3±9,4 23,5±17,9 0 14,2±семь, 8 0 Апрель 5 27,4±13,3 9,6±5-6 0 9,8±7,2 0,2±0,2 Май 17 31,9±8,4 19,7±6,9 0,5±0,пять с половиной,4±1,0 1,9±1,2 Июнь 52 28,0±5,4 10,9±2,5 0,3±0,3 8,9±1,4 2-четыре±0,6 Июль 3 3,7±2,0 9,7±7,3 0 3,0±2,1 0 Август (контроль) 7 21,3±13,четыре с половиной,9±2-4 0 4,1±1,8 %-1,4±1,0 Сентябрь 4 34,0±21,1 18,5±11,2 0 9,8 %-1,4 1,0±0,6 Октябрь 3 3,3±одного-3 61,7±30,9 0 7,0±нескольких 1-3 процентов±0,7 Ноябрь 6 12,0±5-7 12,3±7,0 0 3,3±3,3 0,8 % процентов % процентов %±0,4 Декабрь 3 51,7-24,1 15,0± 10,0 0 15,0±9,0 0 Среднее 9,трех-четырех,1 27,2±6,7 16,более шести,3 0,1±0,1 8,2±1,1 1,1±0,4 Примечание. Средние значения по удвоенным гаплоидам при двух температурах выращивания растений-доноров статистически значимо различаются при р = 0,05; различия по средним значениям гапло- Идов статистически недостоверны. Среднее число регенерантов разного типа на каллус исходя из температуры выращивания исходных растений указано в таблице 2. Статистически значимых различий по группам гаплоидов и удвоенных гаплоидов между месяцами как правило не отмечали лишь между средними значениями удвоенных гаплоидов в июне и октябре при темпера- Туре выращивания растений-доноров 21 °с наблюдалась достоверная разница ^ = 4,26 при р = 0,0001). По базовому значению, рассчитанному для температур 24 и 21 °с, были выявлены различия ^ = 2,39 при р = 0,05) для удвоенных гаплоидов (см. Табл. 2). Существовала средняя корреляционная зависимость между долей каллусов с зелеными регенерантами и средним числом удвоенных гаплоидов на каллус (г = 0,59 при р = 0,05). Это значит, что с ростом числа каллусов с зелеными регенеранта-ми, которое наблюдалось при 21 °с, возрастал общий выход удвоенных гаплоидов. По количеству гаплоидов такой зависимости не обнаружили. Общий качество полученных регенерантов составил 2464 и 5798 растений при температурах выращивания растений-доноров соответственно 24 и 21 °с. Самое приемлемое количество регенерантов получили в мае-июне под интенсивностью каллусообразования (рис. 2). При темпрературе воздуха 24 °с наблюдается незначительное возрастание регенерационной мастерство в декабре. Рис. 2. Регенерация из каллуса в зависимости от месяца введения пыльников риса (oryza sativa spp. Japónica) сорта каскад в культуру in vitro при темпрературе воздуха выращивания растений-доноров 24 °с (а также 21 °с (б): а - гаплоиды, б - удвоенные гаплоиды, в - погибшие растения, г - растения без семян, д - тетраплоиды. Рис. 3. Распределение регенерантов по группам зависимо от месяца введения пыльников риса (oryza sativa spp.Japónica) сорта каскад в культуру in vitro при температуре выращивания растений-доноров 24 °с (а к нему 21 °с (б): а - гаплоиды, б - удвоенные гаплоиды, в - погибшие растения, г - растения без семян, д - тетраплоиды. Доля регенерантов разнообразного вида была неодинаковой в вариантах с Разной температурой выращивания растений-доноров. Так, при 24 °с удовольствием преобладали гаплоидные растения, их доля за год исследований составила 65,три варьировала по месяцам от 50,0 до 93,3 % см. Рис. 3, а). Доля удвоенных гаплоидов примерно за год составила 20,3 %, варьирование по месяцам - в пределах 0 до 42,2 %. При 21 °с примерно за год получили 52,6 % гаплоидов (варьирование от четырёх,6 до 90,5-и 28,1 % удвоенных гаплоидов (от одного,0 до 84,1 %) (см. Рис. 3, б). Иначе говоря при понижении температуры выращивания исходных растений в климатической камере наблюдалось увеличение доли удвоенных гаплоидов из полученных зеленых реге-нерантов. Это происходило за счет увеличения среднего числа регенеран-тов с каллуса. При употреблении низкой для риса температуры в отдельные месяцы (март, июль, октябрь, ноябрь) доля удвоенных гаплоидов преобладала над долей гаплоидных растений (см. Рис. 3). Никакой зависимости в группах нежизнеспособных регенерантов, тетраплоидов и стерильных растений негаплоидного происхождения в эксперименте обнаружено не существовало, период и температуры выращивания исходных растений не оказывали воздействие на частоту их появления. Видимо, их формирование в каллусе имело спонтанный характер. Выявленная сезонная зависимость андрогенетических ответов у риса хорошо согласуется с общебиологическими законами. Весна и июнь - наиболее благоприятный время активного активного прорастания семян и вегетативного размножения растений. Очевидно, что же в искусственных условиях выращивания вот в этот период интенсифицируются каллусообразование и регенерация в истории пыльников in vitro. Черенкование других растений в истории in vitro еще: больше всего успешно весной (10-12). Вполне оправдано использование закрытых помещений, парников, климакамер) не столько задавшись целью создания регулируемых критериев для разведения растений-доноров, что часто практикуется исследователями (пять или шесть), так и с целью использования благоприятного периода введения пыльников в культуру in vitro. Л.А. Першина с соавт. (25) отмечают негативную реакцию некоторых сортов пшеницы в культуре пыльников in vitro при выращивании растений-доноров в теплице. Возможно с учетом сезонной зависимости андрогенетических ответов, результат мог быть другим. Низкая температура при выращивании растений-доноров (21 °с) служила дополнительным стрессором, который стимулировал андрогене-тические ответы риса и позволил получать регенеранты на протяжении всего года, на тот момент как при более благоприятной температуре (24 °с) это было доступно лишь в самостоятельные месяцы. Для переведения программы развития микроспоры зерновых с гаметофитного дороги на спорофитный используются шоковые температуры (4-12 °с) предобработки пыльников (2,5, 7). Предельно низкая для риса температура выращивания растений-доноров дополняет и усиливает этот эффект. Ряд исследований демонстрируют, что не существует нужды создавать лучшие предложения для роста и образования растений-доноров, как принято считать. Стресс, в том числе температурный, усиливает каллусообразование и регенерацию (цит. По 20, 21). Таким образом, существует сезонная зависимость каллусообразова-ния в культуре пыльников риса in vitro. Максимальная частота каллусооб-разования ведется на май-июнь. Температура выращивания растений-доноров оказывает влияния на интенсивность каллусообразования и регенера-ционную способность побегов из пыльников. Пониженная для риса температура 21 °с дает возможность получать каллус с разной интенсивностью на всей продолжительности года, при оптимальной для риса температуре 24 °с каллусооб-разование возможно в периоды с мая месяца по сентябрь и в декабре, январе. При температуре выращивания растений-доноров 21 °с из пыльников формируется фактически в 4 раза больше каллусов с зелеными регене-рантами (31,6 %) в сопоставлению с температурой 24 °с (8,8 %), доля удвоенных гаплоидов увеличивается до 28,1 %, их среднее число на каллус - до 16,6 шт. Литература 1. Niizeki b.H. Oono k. Induction of haploid rice plant from anther culture. Proceedings of the japan academy, 1968, 44(6): 554-557 (doi: 10.2183/pjab1945.44.554). 2. Mishra r. Rao g.J.N. In-vitro androgenesis in rice: advantages, constraints and future prospects. Rice science, 2016, 23(2): 57-68 (doi: 10.1016/j.Rsci.2016.02.001). 3. Xu l. Najeeb u. Tang g.X. Gu h.H. Zhang g.Q. He y. Zhou w.J. Haploid and doubled haploid technology. In: advances in botanical research-rapeseed breeding /s.K. Gupta, m. Delseny, j.-C. Kader (eds.). Academic press, london, 2007: 181-216 (doi: 10.1016/s0065-2296(07)45007-8). 4. Dunwell j.M.Haploids in flowering plants: origins and exploitation. Plant biotechnology journal, 2010, 8(4): 377-424 (doi: 10.1111/j.1467-7652.2009.00498.X). 5. Ferrie a.M. Caswell k.L. Isolated microspore culture techniques and recent progress for haploid and doubled haploid plant production. Plant cell tiss. Organ cult. 2011, 104(3): 301-309 (doi: 10.1007/s11240-010-9800-y). 6. Datta s.K. Androgenic haploids: factors controlling development and its application in crop improvement. Current science, 2005, 89(11): 1870-1878. 7. Germana m.A. Anther culture for haploid and double haploid production. Plant cell organ. Cult. 2011, 104(3): 283-300 (doi: 10.1007/s11240-010-9852-z). 8. Болвелл г.П. Вуд к.Р. Гонзалес р.А. И др. Биотехнология растений: культура клеток /пер. С англ. В.И. Негрука; с предисл. Р.Г. Бутенко. М. 1989. 9. Уразалиев к.Р. Культуры клеток и тканей высших растений - перспективный источник ценных химии. Биотехнология. Теория и опыт, 2016, 2-4-19. 10. Султонова м.С. Нимаджанова к. Влияние сроков черенкования и регуляторов роста на жизнеспособность черенков sequoadendron giganteum (lindl.) J. Buchholz с соблюдением in vitro. Новые технологии и продовольственная безопасность, 2014, 4: 77-81. 11. Егорова н.А. Ставцева и.В. Микроразмножение сортов эфиромасличной розы в культуре in vitro. Вестник удмуртского университета, 2016, 26(2): 45-52. 12. Митрофанова и.В. Митрофанова о.В. Браилко в.А. Лесникова-седошенко н.П. Биотехнологические и физиологические особенности культивирования in vitro ценных генотипов розы эфиромасличной. Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология, 2015, 2(13): 37-48. 13. Bishnoi u.S. Jain r.K. Gupta k.R. Chowdhury v.K. Chowdhury j.B. High frequency androgenesis in indica x basmati rice hybrids using liquid culture media. Plant cell, tissue and organ culture, 2000, 61(2): 153-159 (doi: 10.1023/a:1006407912576). 14. Lapitan v.C. Redoña e.D. Abe t. Brar d.S. Molecular characterization and agronomic performance of dh lines from the f1 of indica and japonica cultivars of rice (oryza sativa l.). Field crop research, 2009, 112(два – три): 222-228 (doi: 10.1016/j.Fcr.2009.03.008). 15. Илюшко м.В. Применение феноксиуксусной кислоты в истории пыльников риса in vitro. Вестник красгау, 2014, 6: 143-148. 16. Smykal p. Pollen embryogenesis - the stress mediated switch from gametophytic to sporophytic development. Current status and future prospects. Biologia plantarum, 2000, 43(4): 481-489 (doi: 10.1023/a:1002835330799). 17. Rout p. Naik n. Ngangkham u. Verma r.L. Katara j.L. Singh o.N. Samantaray s. Doubled haploids generated through anther culture from an elite long duration rice hybrid, crhr32: method optimization and molecular characterization. Plant biotechnology, 2016, 33: 177-186 (doi: 10.5511/plantbiotechnology.16.0719a). 18. Premvaranon p. Vearasilp s. Thanapornpoonpong s. Karladee d. Gorinstein s. In vitro studies to constuct double haploid in indica hybrid rice. Biologia, 2011, 66(6): 1074-1081 (doi: 10.2478/s11756-011-0129-8). 19. Mishra r. Rao g.J.N. Rao r.N. Kaushal p. Development and characterization of elite doubled haploid lines from two indica rice hybrids. Rice science, 2015, 22(6): 290-299 (doi: 10.1016/j.Rsci.2015.07.002). 20. Гончарова ю.К. Использование метода культуры пыльников в селекции риса. Краснодар, 2012. 21. Ilyushko m.V. Effect of growing conditions of rice donor plants on anther culture in vitro. Journal of agricultural science and technology, 2015, 5: 686-694 (doi: 10.17265/21616256/2015.08.007). 22. Chu c. The n6 medium and its applications to anther culture of cereal crops. Proceedings of symposium on plant tissue culture, 25-30 may 1978, peking. Science press, peking, 1978: 43-50. 23. Илюшко м.В. Сравнительный анализ питательных сред для регенерации растений риса из каллуса в культуре пыльников in vitro. Известия тсха, 2017, 2: 126-133. 24. Murashige t. Skoog f. A revised medium for prompt growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiologia plantarum, 1962, 15: 473-497 (doi: 10.1111/j.1399-3054.1962.Tb08052.X). 25. Першина л.А. Осадчая т.С. Бадаева е.Д. Белан и.А. Россеева л.П. Изучение особенностей андрогенеза в культуре пыльников сортов и денежной формы яровой мягкой пшеницы западносибирской селекции, различающихся наличием или отсутствием пшенично-чужеродных транслокаций. Вавиловский журнал генетики и селекции, 2013, 17(1): 40-49. Фгбну приморский нии агрохозяйств, поступила в редакцию 692539 россия, приморский край, п. Тимирязевский, 25 сентября 2018 года Ул. Воложенина, 30, E-mail: ilyushkoiris@mail.Ru н, romashova_1969@mail.Ru sel'skokhozyaistvennaya biologiya [agricultural biology], 2019, v. 54, № 3, pp.557-565 Сезонность андрогенетических ответов между культурой пыльников in vitro у риса (oryza sativa l.) М.В. Илюшко, м.В. Ромашова Приморский научно-исследовательский институт сельского хозяйства, 30, ул. Воложенина, пос. Тимязевский, приморский край, 692539 россия, e-mail ilyushkoiris@mail.Ru (н автор-корреспондент), romashova 1969@mail.Ru orcid: Илюшко м.В. Orcid.Org/0000-0001-7042-8641 ромашова м.В. Orcid.Org/0000-0002-7426-8523 Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов Поступила в редакцию 25 сентября 2018 г. Doi: 10.15389/agrobiology.2019.3 .557rus Аннотация Рассмотрены условия выращивания растений-доноров при андрогегезе in vitro с точки зрения влияния на растения физических факторов ( освещенность, продолжительность светового дня, температура, питание растений). Априори считается, что для культивирования тканей растений in vitro подходит любой период года (сезона), и в этом главный плюс технологий in vitro по сравнению с традиционными. Сезонность учитывается только при сравнении растений-доноров, выращенных между полевыми и контролируемыми условиями. Однако мы не обнаружили сообщений об изучении использования процедуры культивирования пыльников in vitro в течение года. В данной работе впервые показано, что при одинаковых условиях выращивания растений-доноров частота каллусообразования и регенерации растений риса (oryza sativa l.) Из пыльников в культуре in vitro различается в зависимости от месяца (сезона) сбора эксплантов. . Целью исследований было изучение сезонной зависимости in vitro андрогенетических ответов о. Sativa при выращивании растений-доноров в условиях климатической камеры. 5-9 растений о. Сатива подвид. Japonica kato, сорт каскадный, высаживали ежемесячно в течение года и выращивали в климатической камере (при 24 °с и 21 °с, 15000 лк, влажности 60 % и фотопериоде 14 световых/10 темных часов) в качестве тестовых пыльников. Доноры. Пыльники естественно выращенных растений служили контролем. Как следствие, выявлена сезонная зависимость каллусогенеза в культуре пыльников риса in vitro. Пик интенсивности каллусообразования приходится на май-июнь (15,5-28,3 %). При выращивании растений-доноров в искусственных условиях при обеих температурах, в хороший для культуры пыльников период in vitro (май-июнь) каллусогенез выше, чем в контроле. Использование климатической камеры позволяет получать в отдельные месяцы стабильно высокие значения интенсивности каллусообразования, что не всегда возможно в естественных условиях. Температура выращивания растений-доноров влияет на частоту образования каллуса риса и его регенерационную способность. Температура ниже оптимальной для растений риса (21 °с) допускает разную частоту каллусообразования в течение года, тогда как комфортная для риса температура (24 °с) приводит к большой сезонной зависимости и каллусообразованию с мая по сентябрь и в декабре и январе. При 21 °с против 24 °с образуется в 4 раза больше каллусов с зелеными регенерантами (31,6 % против 8,8 %), с увеличением доли удвоенных гаплоидов до 28,1 % и их числа в каллусе до 16,6. Выявлена умеренная корреляция между долей каллусов с зелеными регенерантами и средним количеством удвоенных гаплоидов на каллус (r = 0,59 при p = 0,05). Это означает, что с увеличением количества каллусов с зелеными регенерантами, что наблюдается при 21 °с, увеличивается и общий выход удвоенных гаплоидов. Что касается количества гаплоидов, то такой зависимости не обнаружено. Таким образом, теплицы и климатические камеры могут служить не только для выращивания исследователями растений-доноров, но и для практического использования наиболее благоприятных периодов для техники культивирования пыльников. |